PCR檢測試劑盒在使用時(shí)可有什么要領(lǐng)
PCR檢測試劑盒采用聚合酶鏈式反應(PCR)技術(shù)檢測,可用于檢測各種待檢標本(如血液、糞便、食物、生物材料等)中所感染的特定細菌或病毒的某一特定基因,進(jìn)而確定該細菌或病毒的感染/污染狀態(tài)。試劑盒中所含引物能特異性擴增該細菌或者病毒的保守區域,不會(huì )交叉擴增細胞基因組。與傳統的選擇性培養基培養檢測方法和免疫血清學(xué)檢測方法相比較,本方法更為快速,特異性更高。
PCR檢測試劑盒引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
PCR檢測試劑盒的使用要領(lǐng):
①開(kāi)始檢測前請仔細閱讀該產(chǎn)品簡(jiǎn)介全文。
②操作時(shí)應盡量避免說(shuō)話(huà),以免引起樣品污染,而造成假陽(yáng)性。
③整個(gè)檢測過(guò)程中,反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區域進(jìn)行,以避免交叉污染。
④盡量使用一次性材料,包括過(guò)濾芯吸頭,EP試管,橡膠手套等。
⑤實(shí)驗時(shí),試劑盒組成中的試劑除酶外使用前應置4℃提前融化(混勻時(shí)禁止激烈振蕩),酶始終置于-20℃保存。
⑥檢測反應管中加入所有的試劑后,應盡快上PCR儀進(jìn)行擴增,以免擴增冷啟動(dòng)及形成過(guò)多的二聚體。
⑦保存:-20℃,保質(zhì)期一年。